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dc.contributor.advisorPohlmann, Adriana Raffinpt_BR
dc.contributor.authorAsbahr, Ana Carolina Cavazzinpt_BR
dc.date.accessioned2022-01-20T04:39:57Zpt_BR
dc.date.issued2014pt_BR
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10183/234287pt_BR
dc.description.abstractA captação de nanocápsulas de núcleo lipídico (LNC) e nanopartículas de proteína de algodão (GONP) foi avaliada em células de câncer de mama MCF7. As GONP foram produzidas por reticulação a partir de concentrado proteico de algodão e cloreto de cálcio. O estudo de pré-formulação revelou que o pH inicial e concentração de reticulante interferem no tamanho e polidispersão das partículas, sendo o sistema mais estável obtido em pH 3,0 e 9 mM de CaCl2. As GONP são esféricas, com superfície levemente rugosa, têm pH de 3,91 ± 0,14, potencial zeta de -20,1 ± 0,608 mV, um diâmetro aproximado de 273,8 ± 12,8 nm (Zave) e PdI de 0,168 ± 0,51 por PCS; 191,5 ± 23,3 nm e Span de 1,93 ± 0,29 por DL e 113,7 nm por MET. A análise de MEVEDS confirmou que os componentes majoritários da estrutura são C, Ca e Cl. Cada mL de suspensão possui 7,00 x 1012 ± 0,2477 partículas. O mecanismo de formação das partículas envolve forças hidrofóbicas e reticulação com íons Ca2+ e sua estabilidade é de 48 h. Para os estudos de captação em células MCF7, foram produzidas GONPf fluorescentes com rod123 e LNCf com PCL covalentemente ligada à roB por deposição interfacial do polímero pré-formado. Os estudos de viabilidade celular por MTT revelaram que GONPf não é tóxica para macrófagos RAW 264.7 e células MCF7 entre 0,152 e 3,056x10-2 m2 de superfície aplicada e LNCf, entre 0,157 e 0,785x10-2 m2, com uma DL50 de 1,02x10-2 m2. A captação das partículas foi avaliada após 24 h de incubação a 37°C/5% CO2 e demonstrou ser dose-dependente. As LNCf são captadas por endocitose mediada por caveolina e as GONPf, por um mecanismo misto envolvendo macropinocitose, endocitose dependente de clatrina e endocitose dependente de caveolina. A presença de tensoativo na superfície das LNCf é a causa provável para a menor captação em relação às GONPf.pt_BR
dc.description.abstractLipid-core nanocapsules (LNC) and Gossypium nanoparticles (GONP) cellular uptake were assessed in breast cancer cells MCF7. GONP were produced by cross-linking a cotton seed proteic concentrate with calcium chloride. Pre-formulation study demonstrated that initial pH and CaCl2 concentration affect the size and polydispersion of nanoparticles. Best result was obtained with pH 3.0 and 9 mM de CaCl2. GONP were spherical, with a slightly rough surface, pH = 3.91 ± 0.14, zeta potential = -20.1 ± 0.608 mV and diameter of 273.8 ± 12.8 nm (Zave) and PdI de 0.168 ± 0.51 measured by PCS; 191.5 ± 23.3 nm and Span 1.93 ± 0.29 measured by laser diffraction and 113.7 ± 10.7 nm measured by TEM. SEM-EDS analysis confirmed that C, Ca e Cl were the main constituent of GONP. Each mL of GONP suspension has 7.00 x 1012 ± 0.2477 particles. Hydrophobic interaction and cross-linking with calcium ions were the basis for GONP formation and the system is stable for 48 h. For cellular uptake studies, fluorescent particles were produced with rhodamine 123 (GONPf). LNCf were prepared by interfacial polymer deposition with PCL covalent linked with rhodamine B. MTT assay showed that GONPf were nontoxic to RAW 264.7 macrophages and MCF7cells in dosis between 0.152 e 3.056x10-2 m2 of applied surface and LNCf, between 0.157 e 0.785x10-2 m2 and LD50 = 1.02x10-2 m2. Nanoparticle uptake was evaluated after 24 h incubation at 37°C/5% CO2 and is dose dependent. LNCf are internalized by caveolin mediated endocytosis. GONPf, on the other hand were internalized by a macropinocytosis, clathrin dependent endocytosis and caveolin dependent endocytosis. Surfactant presence at LCNf surface may contribute to a less extent uptake relative to GONPf.en
dc.format.mimetypeapplication/pdfpt_BR
dc.language.isoporpt_BR
dc.rightsOpen Accessen
dc.subjectLipid-core nanocapsulesen
dc.subjectNanotecnologiapt_BR
dc.subjectCotton seed protein nanoparticlesen
dc.subjectNanocápsulas poliméricaspt_BR
dc.subjectNanopartículaspt_BR
dc.subjectUptake mechanismen
dc.subjectCaptação celularpt_BR
dc.subjectProteína de algodãopt_BR
dc.titleNanocápsulas de núcleo lipídico e nanopartículas de proteína vegetal fluorescentes : estudo de captação em culturas celularespt_BR
dc.typeTesept_BR
dc.contributor.advisor-coBeck, Ruy Carlos Ruverpt_BR
dc.identifier.nrb000944978pt_BR
dc.degree.grantorUniversidade Federal do Rio Grande do Sulpt_BR
dc.degree.departmentFaculdade de Farmáciapt_BR
dc.degree.programPrograma de Pós-Graduação em Nanotecnologia Farmacêuticapt_BR
dc.degree.localPorto Alegre, BR-RSpt_BR
dc.degree.date2014pt_BR
dc.degree.leveldoutoradopt_BR


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