Produção de hidrogéis contendo antifúngicos : a busca por um curativo bioativo

Abstract

Monitorar ferimentos tópicos e protagonizar o bloqueio e o tratamento de possíveis patógenos e infecções recorrentes em uma lesão é um desafio que tem aliado médicos e pesquisadores pelo mundo todo. Buscar alternativas curativas que supram as necessidades do paciente ao mesmo tempo que sejam acessíveis, eficientes, práticas e biocompatíveis é uma temática cada vez mais estudada e aplicada nos tratamentos modernos. Esse trabalho objetiva essa busca: a produção de um hidrogel bioativo como matriz curativa, formulado com duas moléculas antifúngicas. A primeira, Jaburetox, é um peptídeo recombinante com atividade antifúngica descrita na literatura em 2012; e a segunda: cetoconazol, um fármaco antifúngico amplamente utilizado desde a década de 1970. Realizando primeiramente uma análise bibliográfica aprofundada sobre os termoschave deste trabalho, em uma plataforma referência (PubMed), observamos que esses temas de estudo, além de cada vez mais pesquisados, apresentam uma carência na literatura quando se observa as suas inter-conexões. Ou seja, não há nenhuma publicação sobre a formulação de hidrogéis com Jaburetox (Jbtx) e poucas formulando cetoconazol nesse tipo matriz. Compreendendo a necessidade de dados mais robustos sobre as propriedades antifúngicas dessas duas moléculas em uma formulação de hidrogel, realizamos a produção desses hidrogéis e análises quantitativas sobre a capacidade antifúngica de Jbtx (em quatro diferentes concentrações) e de cetoconazol (em três diferentes doses) pelo método Drop plate em Candida albicans. Observamos que tanto os hidrogéis formulados com Jbtx quanto com cetoconazol apresentaram uma atividade antifúngica estatisticamente significativa nas menores concentrações testadas (8,25 µM para Jbtx e na dose de 10 µg para cetoconazol). Porém, essa atividade não se manteve estável dentre todas as replicatas biológicas, principalmente para o Jbtx, que apresentou diferentes resultados dependendo do tempo de estocagem dos hidrogéis. Além disso, realizou-se um teste de citotoxicidade em queratinócitos humanos para aferir a biocompatibilidade dos hidrogéis formulados com cetoconazol, cujos resultados demonstraram certo grau de citotoxicidade. Dessa forma, apesar de observarmos alguns resultados positivos quanto à atividade antifúngica de Jbtx e cetoconazol em hidrogéis, há a necessidade de mais estudos sobre o tema avaliando diferentes formulações de hidrogéis. Dessa maneira, poderemos encontrar o que de fato buscamos: aliar o potencial antifúngico desses hidrogéis à biocompatibilidade necessária para utilizá-los como curativos bioativos.

Monitoring topical wounds and playing a lead role in the blockade and treatment of possible pathogens and recurrent infections of an injury is a challenge that has allied physicians and researchers all around the world. Seeking healing alternatives that meet the patient's needs while being accessible, efficient, practical and biocompatible is an increasingly studied and applied theme in modern treatments. This project aims towards this search: the production of a bioactive hydrogel as a curative matrix, formulated with two antifungal molecules. The first one, Jaburetox, is a recombinant peptide with its antifungal activity described in literature in 2012; and the second: ketoconazole, a widely used commercial antifungal since the 1970s. We started by conducting an in-depth bibliographical analysis of the key terms of this work in a reference platform (PubMed). By doing so, we observed that these themes of study, besides being increasingly researched, yet present a lack in literature when observing their inter-connections. That is, there are no publications about the formulation of hydrogels containing Jaburetox (Jbtx) and few formulating ketoconazole in this kind of matrix. Understanding the need for more robust data on the antifungal properties of these two molecules in a hydrogel formulation, we performed the production of these hydrogels and quantitative analyzes on the antifungal capacity of Jbtx (at four different concentrations) and ketoconazole (at three different doses) by using the Drop Plate method in Candida albicans. Both hydrogels formulated with Jbtx and ketoconazole showed a statistically significant antifungal activity at the lowest concentrations tested (8.25 µM for Jbtx and at dose 10 µg for ketoconazole). However, this activity was not stable among all biological replicates, especially for Jbtx, which presented different results depending on the hydrogels stocking time. In addition, a cytotoxicity test using human keratinocytes aiming to test biocompatibility was performed on the hydrogels formulated with ketoconazole, which results showed certain level of cytotoxicity. Thus, although we observed some positive results regarding the antifungal activity of Jbtx and ketoconazole, there is a need for further studies on the subject evaluating different formulations of hydrogels. By doing so, we will be able to find what we are truly looking for: combine the antifungal potential of these hydrogels with the necessary biocompatibility to use them as bioactive wound dressings.