Avaliação da atividade antimicrobiana de derivados de 8-hidroxiquinolina

Abstract

Torna-se cada vez mais necessário o desenvolvimento de antimicrobianos diante do aumento da incidência de infecções por microrganismos multirresistentes. Diante disso, foi desenvolvida uma série de 5 análogos metilados da 8-hidroxiquinolina, um grupamento presente em vários compostos que apresentam ação antimicrobiana. A atividade antibacteriana foi avaliada pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM) frente a cepas ATCC de bactérias gram positivas e gram negativas de importância clínica. O análogo PH176 apresentou CIM de 8μg/mL para o ATCC S. aureus 29213 e foi selecionado para testes posteriores. As CIM50 e CIM90 do PH176 foram de 16 e 32 μg/mL respectivamente, frente a uma coleção de 38 isolados clínicos de S. aureus, sendo 10 caracterizados como MRSA. As atividades antimicrobianas e o efeito sinérgico com antibióticos já conhecidos foram avaliadas através da técnica Time-Kill em 5 isolados MRSA. O PH176 utilizado isoladamente resultou em redução na contagem de colônias em 24 horas, sem recrescimento em 4 isolados, nas concentrações de 1x e 2xCIM. O efeito bactericida foi observado em um isolado na concentração de 2xCIM. A combinação com 1xCIM de Oxacilina resultou em sinergia com ½xCIM do PH176 em 3 isolados, com 1xCIM PH176 em 2 e com 2xCIM PH176 em 1 isolado. Na concentração de ponto de corte da Oxacilina o efeito sinérgico foi obtido em 2 isolados com 1xCIM e 2xCIM do PH176. Concentrações de PH176 acima dos valores de CIM foram consideradas não citotóxicas e não dermotóxicas nos testes de HET-CAM, determinação da permeação e avaliação histopatológica em pele de suíno e viabilidade celular em leucócitos humanos. Esses resultados demonstram que a molécula PH176 é altamente promissora como uma nova alternativa para o combate a isolados MRSA.

The development of antimicrobials is becoming increasingly necessary in view of the increased incidence of multi-resistant microorganism. Thus, our group developed a series of 5 methylated analogs of 8-hydroxyquinoline, considering that this grouping is present in several compounds with antimicrobial action. Antibacterial activity of the analogues was evaluated by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) against ATCC strains of gram positive and gram negative bacteria of clinical importance. The PH176 analog presented a MIC of 8μg/mL for ATCC S. aureus 29213 and was selected for further testing. When evaluate in a collection of 38 S. aureus clinical isolates, 10 of which characterized as MRSA, the MIC50 and MIC90 of PH176 were 16 and 32 μg/mL respectively. The antimicrobial activities and the synergistic effect with known antibiotics were evaluated by Time-Kill assay in 5 MRSA isolates. PH176 used alone resulted in a reduction in colony count at 24h with no regrowth in 4 isolates at concentrations of 1x MIC and 2xMIC. Bactericidal effect occur in one isolate in concentration of 2xCIM. The combination with 1xCIM of Oxacillin resulted in synergy with ½xCIM of PH176 in 3 isolates, with 1xCIM PH176 in 2 isolates and with 2xCIM PH176 in 1 isolate. Synergistic effect was also observed in 2 isolates with 1xCIM and 2xCIM of PH176 and the Oxacillin breakpoint (2μg/mL) concentration. Concentrations above MIC values of PH176 were considered non-cytotoxic and non-irritant in HET-CAM tests, permeation determination and histopathological evaluation in pig skin and in analysis of cell viability in human leukocytes. These results demonstrate that the PH176 is highly promising for the development of a novel therapy for the treatment of MRSA infections.