Avaliação dos efeitos da associação de pregabalina e estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) em um modelo animal de fibromialgia

Abstract

Síndrome Fibromiálgica caracteriza-se por dor generalizada, fadiga, sono não reparador e sintomas cognitivos. Os grupos farmacológicos mais utilizados para o tratamento desta condição são antidepressivos e anticonvulsivantes. Dentre as terapêuticas disponíveis, a pregabalina tem se mostrado uma importante opção farmacológica na redução da dor e melhora da qualidade de vida em pacientes. Por outro lado, estudos pré-clínicos e clínicos têm demonstrado que técnicas neuromodulatórias são promissoras no tratamento de quadros de dor crônica, podendo ser uma opção para o tratamento da fibromialgia. Este estudo objetiva avaliar o possível efeito sinérgico antinociceptivo entre estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) e pregabalina em modelo de fibromialgia em ratos. Quarenta ratos Wistar machos adultos foram inicialmente divididos em dois: controle (CT) e fibromialgia (FM) e, após a submissão ao modelo de fibromialgia, foram subdivididos em: grupo controle (CT), reserpina + pregabalina + ETCC-sham (RPTs), reserpina + pregabalina + ETCC-ativo (RPT), reserpina + veículo pregabalina + ETCC-sham (RVTs) e reserpina + veículo pregabalina + ETCC-ativo (RVT). O modelo de fibromialgia foi induzido pela aplicação de reserpina (3 dias, 1 mg/Kg, s.c.). Os comportamentos avaliados foram: resposta nociceptiva (von Frey e placa quente), comportamento do tipo depressivo (nado forçado) e comportamento do tipo ansioso (labirinto em cruz elevado). As intervenções utilizadas foram 8 dias de aplicação de ETCC (20 min/0,5mA) e/ou de administração oral de pregabalina (30mg/kg, gavagem). Os ratos foram mortos por decapitação para coleta das amostras biológicas. Os marcadores bioquímicos fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF), interleucinas 1β e 10, e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) foram mensurados por ELISA. Este estudo foi aprovado pela CEUA/-HCPA #2015-0272. Os ratos submetidos ao modelo de fibromialgia apresentaram hiperalgesia térmica (placa-quente) e mecânica (von Frey), indexadas por um menor limiar nociceptivo (teste t, P<0,0001 e P=0,01 respectivamente), aumento do tempo de imobilidade no teste de nado forçado (teste t, P=0,004), aumento no comportamento de grooming, redução nos comportamentos de non-protected head-dipping (NPHD) e rearing (ANOVA de uma via, P= 0,03, P=0,03 e P< 0,01 respectivamente) com redução de níveis séricos de BDNF (teste t, P<0.05). Adicionalmente, ratos com fibromialgia tratados com ETCC (associado ou não a pregabalina) apresentaram uma reversão parcial do comportamento hipernociceptivo (ANOVA de uma via, P<0.05), reversão do aumento do grooming e da diminuição dos níveis séricos de BDNF induzido pelo modelo após tratamento com ETCC. A administração de pregabalina reverteu a diminuição do NPHD induzida pelo modelo. O presente estudo demonstra que a ETCC é uma importante ferramenta para aliviar comportamento nociceptivo em quadros de dor crônica, assim como reverter comportamentos do tipo ansioso relacionados ao modelo de fibromialgia. Além de reverter a diminuição dos níveis séricos de BDNF. No entanto, não foi observado efeito sinérgico na associação de ETCC e pregabalina nos efeitos avaliados no modelo de fibromialgia induzido pela reserpina.

Fibromyalgic syndrome is characterized by generalized pain, fatigue, non-restorative sleep, and cognitive symptoms. The pharmacological groups most used for the treatment of this condition are antidepressants and anticonvulsants. Among the available therapies, pregabalin has been shown to be an important pharmacological option in reducing pain and improving quality of life in patients. On the other hand, preclinical and clinical studies have shown that neuromodulatory techniques are promising in the treatment of chronic pain, and may be an option in the treatment of fibromyalgia.This study aims to evaluate the possible synergistic antinociceptive effect between transcranial direct current stimulation (tDCS) and pregabalin in a rat model of fibromyalgia.Forty adult male Wistar rats were initially divided into two: control (CT) and fibromyalgia (FM) and, after submission of the fibromyalgia model, they were subdivided into: control group (CT), reserpine + pregabalin + tDCS-sham (RPTs), reserpine + pregabalin + tDCS-active (RPT), reserpine + pregabalin vehicle + tDCS-sham (RVTs) and reserpine + pregabalin vehicle + active tDCS (RVT). The fibromyalgia model was induced by the application of reserpine (3 days, 1 mg/kg, s.c.). The behaviors evaluated were: nociceptive response (von Frey and hot plate), depressive-like behavior (forced swimming) and anxious-like behavior (elevated plus maze). The interventions used were 8 days of tDCS application (20 min/0.5mA) and/or oral administration of pregabalin (30mg/Kg, gavage). Rats were killed by decapitation to collect biological samples. The biochemical markers brain-derived neurotrophic factor (BDNF), interleukins 1β and 10, and tumor necrosis factor alpha (TNF-α)] were measured by ELISA. This study was approved by CEUA/-HCPA #2015-0272. Rats submitted to the fibromyalgia model showed thermal (hot plate) and mechanical (von Frey) hyperalgesia, indexed by a lower nociceptive threshold (t test, P<0.0001 and P=0.01 respectively), increased immobility in the forced swimming test (t test, P=0.004), increase in grooming behavior, reduction in non- protected head-dipping (NPHD) and rearing behaviors (one-way ANOVA, P= 0.03, P= 0.03 and P<0.01 respectively) with reduced serum BDNF levels (t-test, P<0.05). Additionally, rats with fibromyalgia treated with tDCS (with or without pregabalin) showed a partial reversal of hypernociceptive behavior (one-way ANOVA, P<0.05), reversal of increased grooming and decreased serum BDNF levels induced by the model. after tDCS treatment. Pregabalin administration reversed the model-induced decrease in NPHD. The present study demonstrates that tDCS is an important tool for alleviating nociceptive behavior in chronic pain conditions, as well as reversing anxious-like and anxious-like behaviors related to the fibromyalgia model. In addition to reversing the decrease in serum BDNF levels. However, no synergistic effect was observed in the association of tDCS and pregabalin in the effects evaluated in the reserpine-induced fibromyalgia model.