Modulação da expressão e da localização celular dos receptores de retinoides durante a diferenciação neuronal induzida pelo ácido retinoico

Abstract

O ácido retinoico, um dos principais metabólitos da vitamina A e um importante morfógeno do sistema nervoso no desenvolvimento, promove a diferenciação e a parada no ciclo celular de células indiferenciadas principalmente por intermédio de receptores nucleares: os RARs (α, β e γ) e os RXRs (α, β e γ). Visando a melhor compreensão dos mecanismos moleculares por trás dos efeitos do ácido retinoico, foi investigada a modulação da expressão e da localização celular dos receptores de retinoides durante a diferenciação neuronal induzida pelo composto na linhagem derivada de neuroblastoma humano SH-SY5Y. A análise por western blot e RT-PCR quantitativo revelou que as diferentes isoformas de RAR e de RXR apresentam níveis variáveis de expressão durante a diferenciação neuronal e a análise por microscopia de imunofluorescência sugeriu o recrutamento da isoforma RARβ para o núcleo diante do estímulo pelo AR. Os resultados evidenciam, assim, a modulação da disponibilidade dos receptores de retinoides durante o tratamento com AR em SH-SY5Y, a qual pode ser essencial no controle da diferenciação neuronal.

Retinoic acid is one of major metabolites of vitamin A and an important morphogen of the nervous system, which promotes differentiation and cell cycle arrest in undifferentiated cells mainly through nuclear receptors: the RARs (α, β and γ) and RXRs (α, β and γ). To clarify the molecular mechanisms underlying retinoic acid effects, the modulation of retinoid receptors expression and cellular localization during retinoic acid-mediated neuronal differentiation was investigated in human neuroblastome cell line SH-SY5Y. Western blot and quantitative RT-PCR analysis showed that distinct RAR and RXR isoforms feature varying degrees of expression through neuronal differentiation and immunofluorescence microscopy suggested RARβ recruitment into the nucleus in response to retinoic acid stimulus. Therefore, modulation of retinoid receptors availability following retinoic acid treatment in SH-SY5Y cells is evidenced, and it may play essential roles in neuronal differentiation.