Efeito da fototerapia laser no preparo in vitro de queratinócitos bucais

Abstract

A fototerapia laser (FTL) tem sido usada clinicamente para auxiliar na cicatrização de inúmeras doenças bucais, especialmente no tratamento de lesões ulceradas. Os mecanismos celulares através dos quais o laser é capaz de promover a bioestimulação não são completamente compreendidos. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar in vitro o efeito da FTL no comportamento de queratinócitos bucais no processo de cicatrização. Células epiteliais bucais (NOK-SI) foram cultivadas sob duas condições nutricionais: suplementadas com 10% de soro fetal bovino (FBS) e sob déficit nutricional (2% FBS) seguido de irradiação com laser de diodo InGaAlP (660nm, 40mW, 4 e 20J/cm2, 4 e 20s), através da técnica pontual e em contato. Foram realizados ensaio de viabilidade celular (MTT), migração celular (cicatrização) e análise proteica (Western Blotting e Fluorescência). Os resultados obtidos indicaram que a FTL influencia diretamente a migração epitelial evidenciado pelo fechamento acelerado das feridas irradiadas e polarização do citoesqueleto celular (F-actina). Conclui-se que os efeitos clínicos da FTL estão associados, entre outros fatores, ao aumento da migração epitelial.

Laser phototherapy (LPT) has been used clinically to accelerate wound healing in a variety of oral diseases. The cell mechanisms by which LPT can promote biostimulation have not yet been fully elucidated. Epithelial cells play an important role in the reparative process since it proliferation and migration from the wound margin is crucial for restore epithelial continuity. It is unclear whether LPT has an effect on epithelial cell migration. Based on this, the aim of this study was to investigate the effect of LPT in oral wound healing process using oral keratinocytes. Oral keratinocytes were maintained under two nutritional conditions supplemented with 10% of fetal bovine serum (FBS) and in nutritional deficit (2% FBS). Laser irradiation was delivered with InGaAlP laser (660nm, 40mW, 4 e 20J/cm2, 4 e 20s). Irradiations were performed in contact, using the punctual irradiation mode. The following tests were performed cell viability, cell migration and protein analysis. Results obtained suggest that LPT influences epithelial migration and cytoskeleton polarization. Interestingly, LPT effect under epithelial cell migration occurs independently of cell viability. In conclusion, clinical LPT effects are associated with an increase in epithelial cell migration.