Avaliação da erradicação de biofilmes de Acinetobacter calcoaceticus-baumannii

Abstract

Cada vez mais se observa a prevalência de resistência a antimicrobianos em bactérias isoladas de diversas amostras hospitalares. Membros do complexo Acinetobacter calcoaceticus-baumannii (ACB) resistentes a antimicrobianos estão entre os principais microrganismos causadores de infecções relacionadas à assistência em saúde em todo o mundo. A permanência no ambiente e a dificuldade de tratamento são especialmente agravadas pela sua capacidade de formar biofilme, visto que a presença do biofilme pode dificultar a ação de antibióticos e de outros agentes antimicrobianos. Dentro deste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade dos antimicrobianos tobramicina e polimixina B em erradicar biofilmes formados por isolados hospitalares de ACB. Para isso, foram utilizados 19 isolados de ACB oriundos de amostras clínicas. A capacidade destes isolados em formar biofilme, bem como a suscetibilidade de cultivos planctônicos à tobramicina e à polimixina B, foram analisadas. Os isolados foram cultivados por 48 h em microplacas na condição de biofilmes. Após este período, a concentração mínima para erradicação de biofilme (CMEB) foi avaliada empregando os fármacos tobramicina e polimixina B, expondo a concentrações de polimixina B, que variaram de 1 a 32 μg/mL, e concentrações de tobramicina de 2 a 256 μg/mL. Foi observado que a concentração de polimixina B necessária para erradicar biofilme de ACB em todos os isolados analisados foi superior a 32 μg/mL, enquanto ao avaliar a tobramicina, dois isolados apresentaram a CMEB de 256 μg/mL, e o restante apresentou concentração superior a 256 μg/mL. A intensidade dos biofilmes classificada como forte, moderada ou fraca não mostrou interferir na CMEB de ambos os fármacos. Também não foi observada relação entre concentrações inibitórias mínimas (CIM) desses fármacos em cultivos planctônicos com as CMEB. Por fim, este estudo mostra a dificuldade em eliminar biofilmes de ACB, o que tem potencial impacto na falha terapêutica de infecções causadas por microrganismos organizados desta maneira. Adicionalmente, aponta para a incapacidade dos testes de rotina laboratorial, que são baseados em determinação de CIM em cultivos planctônicos, em predizer a suscetibilidade de biofilmes de ACB a antimicrobianos.

The prevalence of antimicrobial resistance in bacteria isolated from several hospital samples is increasing steadily. Members of the Acinetobacter calcoaceticus-baumannii (ACB) complex resistant to antimicrobials are one of the main microorganisms that cause healthcare associated infections worldwide. The permanence in the environment and the complexity of treatment are further complicated by the capacity to form biofilm, which can prevent the action of antibiotics and other antimicrobial agents. In this context, this study aimed to analyze the capacity of tobramycin and polymyxin B in eradicating the biofilms formed by clinical isolates of ACB. It used 19 clinical ACB isolates and the capacity to form biofilm and the susceptibility to tobramycin and polymyxin B in planktonic state were determined. The isolates were grown for 48 hours in microplates for the formation of biofilm. After that, the minimal biofilm eradication concentration (MBEC) was determined, employing concentrations of 1 to 32 μg/mL and 2 to 256 μg/mL of polymyxin B and tobramycin, respectively. It was observed that the concentration of polymyxin B needed to eradicate all ACB biofilms was higher than 32 μg/mL. For tobramycin, two isolates presented a MBEC of 256 μg/mL, while the remaining isolates presented a MBEC higher than 256 μg/mL. The intensity of biofilms was classified as strong, moderate or weak, and it did not present any interference in the MBEC of both drugs. Also, it was not observed any relation in the minimal inhibitory concentration (MIC) observed in planktonic state and the MBEC for both antibiotics. Finally, this study shows the difficulty in eradicating ACB biofilms, which has potential impact in therapeutic failure in infections caused by them. Additionally, it shows the incapacity of routine laboratory tests, which are based in determination of MIC in planktonic cultures, to predict the susceptibility of ACB biofilms to antimicrobials.