Influência da idade larval na sensibilidade do zebrafish (Danio rerio) em ensaios de toxicidade aguda

Abstract

Ensaios de Toxidade Aguda com Peixes (AFT – Acute Fish Toxicity) são amplamente utilizados em avaliação de risco com efluentes e no monitoramento ecotoxicológico. Em vários países a execução de ensaios AFT utilizando Danio rerio como organismo modelo é regulada por protocolos como a OECD 203 ou a brasileira NBR ISO 15088, que determinam a utilização do peixe em sua fase juvenil ou adulta. Considerando que estudos trazem a informação de fases larvais de D. rerio exibirem uma sensibilidade muito mais elevada, o objetivo principal deste estudo é a avaliação das diferentes idades larvais em exposição a uma solução de referência (KCl), com o intuito de que uma ótima idade ou faixa etária possa ser estabelecida para seu uso em ensaios AFT. Peixes com idades de 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 e 24 dpe (dias pós-eclosão) foram expostos a cinco diferentes concentrações de KCl (mais grupo controle) em ensaios AFT de 48 horas. Ademais, um ensaio de toxicidade com um efluente real foi realizado para observar se os resultados se encaixariam na tendência dos de KCl. Complementarmente, medidas de comprimento de peixes nas diferentes idades avaliadas foram coletadas. Como resultado, a sensibilidade ao KCl evidenciou uma faixa ótima para o uso de D. rerio em ensaios AFT do 6° dpe até o 14° dpe. O ensaio com efluente apresentou uma tendência de curva semelhante ao que foi encontrado nos ensaios com KCl. Considerando a maior sensibilidade de D. rerio na fase larval, ressaltamos a necessidade de revisão dos atuais protocolos de ensaio de toxicidade aguda com peixes, em função da idade dos organismos utilizados.

Acute Fish Toxicity (AFT) tests are largely used for effluent risk assessment and/or ecotoxicological monitoring. In many countries, AFT tests execution using Danio rerio as a model organism are regulated by protocols like OECD 203 or the Brazilian NBR ISO 15088, which determine the use of juvenile or adult fish. Considering that studies bring the information of larval stages of D. rerio exhibiting a much-increased sensitivity, the main objective of this study is the evaluation of different larval ages in exposure to a reference solution (KCl), in order that an optimum age or range can be established for its use in AFT tests. Fish aging 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 and 24 dph (days post-hatching) were exposed to five different concentrations of KCl (plus control) in 48 hours AFT tests. The LC50 results were inserted in a sensitivity curve. Moreover, an effluent toxicity test was performed to observe if the results fit the tendency of the KCl ones. Complementary, length measurements from the fish ages were taken. As results, the KCl sensitivity evidenced an optimum range for the use of D. rerio in AFT tests going from the 6th dph until the 14th dph. The effluent testing showed similar curve pattern to what was found in KCl testing. Considering the increased sensitivity of D. rerio during the larval stage, we emphasize the need for a review of the actual fish toxicity test protocols, due to used organism age.