Expressão dos Cotransportadores de cloreto no cerebelo e estriado de ratos neonatos de ambos os sexos

Abstract

O GABA, o principal neurotransmissor inibitório do sistema nervoso central em mamíferos adultos, tem papel excitatório no início do neurodesenvolvimento. Os efeitos despolarizantes (excitatórios) ou hiperpolarizantes (inibitórios) provocados pelo GABA dependem da concentração do ânion cloreto dentro e fora da célula. Para promover essas respostas GABAérgicas, os neurônios possuem os transportadores transmembrana NKCC1 e KCC2. O NKCC1 injeta íons cloreto para dentro da célula, aumentando a concentração interna deste íon, e o KCC2 ejeta íons cloreto para fora da célula, diminuindo a concentração interna deste íon. O padrão de expressão e atividade destes cotransportadores de cloreto é dependente da região, do sexo e da idade. Considerando a escassez de dados em relação ao dimorfismo sexual de estruturas do SNC fundamentais para a motricidade, no presente estudo avaliamos a expressão de NKCC1 e KCC2 no cerebelo e estriado de ratos Wistar neonatos (P3 e P7) de ambos os sexos através da técnica de Western blot. Os resultados obtidos demonstram que no cerebelo de machos houve redução da expressão de NKCC1 e KCC2 de P3 para P7, ao passo que em fêmeas não houve redução de nenhum cotransportador. Já no estriado de machos não houve redução de expressão de NKCC1 e KCC2, enquanto que em fêmeas houve redução apenas de NKCC1 de P3 para P7. A razão entre NKCC1 e KCC2 no cerebelo não apresentou diferença entre os sexos ou entre as idades. Já no estriado, houve redução na razão NKCC1/KCC2 entre fêmeas P3 e P7, mas em machos, não. Assim, parece haver um dimorfismo sexual importante desses transportadores em ratos neonatos.

GABA is the major central nervous system inhibitory neurotransmitter in adult mammals and plays an excitatory role in the onset of neurodevelopment. The depolarizing (excitatory) or hyperpolarizing (inhibiting) effects caused by GABA depends on the concentration of chloride anions inside and outside the cell. To promote these GABAergic responses, neurons have transmembrane proteins NKCC1 and KCC2. NKCC1 injects chloride into the cell, increasing the internal concentration of this ion, and KCC2 eject the chloride out of the cell, decreasing the internal concentration of this ion. The expression pattern and activity of these chloride cotransporters depend on region, gender and age. Considering the scarcity of data regarding the sexual dimorphism of fundamental CNS structures of motricity, in present study we evaluated the expression of NKCC1 and KCC2 in the cerebellum and striatum of neonatal Wistar rats at ages P3 and P7 of both sexes with Western Blot. The obtained results show that the male cerebellum reduced NKCC1 and KCC2 expression between P3 and P7, whereas in females that was not reduced of any cotransporter. In the striatum there was no reduction of NKCC1 and KCC2 expression, whereas there was a reduction of only NKCC1 between P3 and P7. The ratio between NKCC1 and KCC2 in the cerebellum did not differ between sexes or age. In the striatum, there was a reduction in the NKCC1/KCC2 ratio between P3 and P7 females, but not males. There was significant sexual dimorphism among neonatal rats.