Padronização da técnica de dosagem de 8-OH-dGuanosina por HPLC, em células de sertoli tratadas com retinol

Abstract

Nos últimos anos tem sido crescente o interesse pelo mecanismo bioquímico através do qual as Espécies Ativas de Oxigênio modificam estruturas biológicas, em particular as alterações no DNA. Células de Sertoli cultivadas, submetidas ao tratamento com retinol, mostraram-se sensíveis a ação prejudicial das EAO, quanto a peroxidação lipídica, aumento de atividade de enzimas antioxidantes e sensibilidade da cromatina a ação de DNAses. A espécie ativa de oxigênio apontada como principal causadora dos danos a biomoléculas é o radical hidroxil. O ferro presente no núcleo das células, através da reação de Fenton, pode gerar este radical, que ataca o DNA in situ. O principal produto deste ataque às bases do DNA, é a 8-oxo-dGuanosina. Neste trabalho foram quantificados os níveis de 8-oxo-dGua, em DNA de células de Sertoli, tratadas ou não com retinol 7μM, através da técnica de HPLC por análise espectrofotométrica e eletroquímica em série. Os resultados mostraram um aumento significativo dos níveis de 8-oxo-dGua em DNA de células de Sertoli tratadas com retinol, indicando que o tratamento em doses acima de 7uM, pode causar danos no DNA. Esses danos podem levar a mutações e transformações celulares malignas, visto que o aumento dos níveis deste aduto no DNA está relacionado com mutações e câncer.