Desenvolvimento e validação de um método por HPLC-DAD para a determinação de ácido fólico em farinhas de trigo

Abstract

A importância dos folatos para a saúde humana associada a sua perda significativa durante o processamento dos alimentos, levou o Brasil a estabelecer a obrigatoriedade de fortificação de farinhas de trigo e milho com no mínimo 150 g de ácido fólico por 100 g de produto. O monitoramento dos níveis dessa vitamina nos produtos fortificados depende de métodos analíticos confiáveis e viáveis economicamente. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi desenvolver um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos (HPLC-DAD) para a determinação de ácido fólico em farinhas de trigo e milho. Além disso, o método foi aplicado em cinco amostras comerciais de farinha de trigo. Nesse método o ácido fólico foi separado em uma coluna C18 utilizando um gradiente de água e acetonitrila ambas acidificadas com 0,1% de ácido fórmico. O método foi desenvolvido e validado com sucesso, apresentando um custo baixo por amostra, facilidade na sua execução, linearidade na faixa de concentração de 0,13 a 3,00 μg.mL-1, baixos valores de limites de detecção (0,04 mg.mL-1) e quantificação (0,11 mg.mL-1), recuperação na faixa de 96-113% e repetibilidade inferior a 10%. A aplicação do método revelou que 40% das amostras comerciais de farinha de trigo analisadas não estão de acordo com a legislação brasileira. Nossos resultados sugerem que os órgãos de fiscalização devem atuar de maneira mais efetiva no monitoramento dos níveis de ácido fólico adicionados na farinha de trigo, bem como as indústrias devem adotar um controle de qualidade maior na fortificação destes produtos.

The importance of folates to human health associated with their significant loss during food processing led Brazil to establish the obligatory fortification of wheat and corn flours with at least 150 g of folic acid per 100 g of product. Monitoring vitamin levels in fortified products depends on reliable and economically feasible analytical methods. In this context, the objective of this work was to develop an analytical method by high performance liquid chromatography with diode arrangement detector (HPLC-DAD) for the determination of folic acid in wheat and corn flours. In addition, the method was applied to five commercial samples of wheat flour. In this method folic acid was separated on a C18 column using a gradient of water and acetonitrile both acidified with 0.1% formic acid. The method was developed and validated successfully, presenting a low cost per sample, ease of execution, linearity in the concentration range of 0.13 to 3.00 μg.mL-1, low detection limit values (0.04 mg.mL-1) and quantification (0.11 mg.mL-1), recovery in the range of 96-113% and repeatability less than 10%. The application of the method revealed that 40% of the commercial samples of wheat flour analyzed are not in accordance with the Brazilian legislation. Our results suggest that surveillance agencies should act more effectively in monitoring the folic acid levels added in wheat flour, as well as industries should adopt a higher quality control in the fortification of these products.