Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação do agrotóxico dicamba em tabaco

Abstract

O Brasil, como grande produtor e exportador agrícola, enfrenta desafios relacionados ao uso intensivo de agrotóxicos em suas lavouras, sendo a análise de resíduos do dicamba em tabaco crucial para assegurar a saúde pública. Um laboratório acreditado pela ANVISA obteve um resultado insatisfatório para a quantificação de dicamba em um estudo interlaboratorial. Este trabalho apresenta a otimização e validação de um método analítico para determinação de dicamba por meio da extração modificada de QuEChERS, que incluiu uma etapa de hidrólise básica, visando melhorar os resultados de recuperação em comparação ao método atual. Na metodologia otimizada, realizou-se uma extração com água e acetonitrila 1:1 (v/v), hidróxido de sódio e aquecimento. A mistura foi neutralizada e particionada com adição de sais. Em seguida, o sobrenadante passou por um clean-up e diluição. Ao final, o extrato foi filtrado e analisado por LC-ESI-MS/MS. Na validação do método analítico foram avaliados os parâmetros seletividade, faixa de trabalho, linearidade, LD, LQ, precisão e exatidão (recuperação e variabilidade). A curva analítica apresentou linearidade entre 8 e 80 ng mL-1 para dicamba, sendo o LQ avaliado de 8 ng mL-1 que obteve um S/N de 38,2. O método apresentou boa precisão, com valores < 11%, e boa exatidão, com recuperações entre 99,2 e 110,1%. Com relação ao efeito matriz, o tabaco tipo Burley apresentou o maior efeito matriz de 47,7%, sendo este corrigido com o uso de padrão interno deuterado de dicamba-d3. O método otimizado apresentou como principais vantagens em relação ao método oficial do laboratório: menor tempo de análise cromatográfica, melhor recuperação e correção de efeitos matriz. Portanto, o novo método foi adequado para a análise de resíduo de dicamba em tabaco, visto que todos os parâmetros de validação atenderam os limites estabelecidos pelo Inmetro para métodos cromatográficos. Como parte do desenvolvimento deste trabalho, foi elaborado um folheto informativo para os agricultores que manuseiam agrotóxicos em suas práticas agrícolas para, assim, conscientizá-los sobre os produtos e seus riscos associados. O folheto foi distribuído para 6 agricultores familiares e disponibilizado na FETAG.

Brazil, as a major agricultural producer and exporter, faces challenges related to the intensive use of pesticides in its crops, as analyzing dicamba residues in tobacco is crucial to ensure public health. A laboratory accredited by ANVISA obtained an unsatisfactory result for the quantification of dicamba in an interlaboratory study. This work presents the optimization and validation of an analytical method for the determination of dicamba using a modified QuEChERS extraction, which included a basic hydrolysis aimed at improving recovery results compared to the current method. In the optimized methodology, an extraction was performed using water and acetonitrile in a 1:1 volume ratio, sodium hydroxide, and heating. The mixture was then neutralized and partitioned with the addition of salts. Subsequently, the supernatant underwent clean-up and dilution. Finally, the extract was filtered and analyzed by LC-ESI-MS/MS. During the validation of the analytical method, the following parameters were evaluated: selectivity, linear range, linearity, detection limit (LoD), quantification limit (LoQ), precision, and accuracy (recovery and variability). The analytical curve showed linearity between 8 and 80 ng mL⁻¹ for dicamba, with an LQ of 8 ng mL⁻¹, which yielded a signal-to-noise ratio (S/N) of 38.2. The method demonstrated good precision, with RSD values below 11%, and good accuracy, with recoveries ranging from 70% to 120%. Regarding the matrix effect, Burley-type tobacco showed the highest matrix effect of 47.7%, which was corrected using a deuterated internal standard, dicamba-d₃. Compared to the laboratory’s current method, the optimized method presented the following main advantages: shorter chromatographic analysis time, improved recovery, and correction of matrix effects. Therefore, the new method proved suitable for dicamba residue analysis in tobacco, as all validation parameters met the limits established by Inmetro for chromatographic methods. As part of this work's development, an informative leaflet was prepared for farmers who handle pesticides in their agricultural practices, aiming to raise their awareness about the products and their associated risks. The leaflet was distributed to 6 family farmers and made available at FETAG.