Avaliação da genotoxicidade do alcaloide azepina indólico cimitripazepina, isolado de fração de Psychotria nemorosa Gardner (Rubiaceae), em células HepG2

Abstract

O gênero Psychotria pertence à família Rubiaceae e compreende mais de 2.000 espécies, distribuídas predominantemente em florestas tropicais e subtropicais. É uma das principais famílias de plantas com flores de interesse econômico com potencial farmacológico. A espécie Psychotria nemorosa Gardner (Rubiaceae) é um arbusto nativo que pode medir de 1 a 2 metros de altura com crescimento endêmico no Brasil, encontrado nas regiões Nordeste, Centro-Oeste, Sudeste e Sul. Recentemente, foi demonstrado que a fração alcaloídica obtida de suas folhas inibiu significativamente as atividades de butirilcolinesterase (BuChE) e da monoamina oxidase A (MAO-A), sendo, assim, uma importante fonte de compostos ativos com efeitos no sistema nervoso central (SNC). Os principais alcaloides azepina indólicos do extrato alcaloídico das partes aéreas de P. nemorosa são a cimitripazepina, a fargesina, as nemorosinas A e B e os nemorosinosídeos. O objetivo deste estudo foi investigar a genotoxicidade in vitro do alcaloide azepina indólico cimitripazepina, isolado de P. nemorosa em células de hepatoblastoma humano HepG2. O alcaloide isolado foi testado nas concentrações de 0,1, 0,5 e 1 mg/mL em meio de cultura celular 24 horas após o plaqueamento. A genotoxicidade foi avaliada pelo ensaio cometa alcalino e pelo teste de difusão de DNA de baixo peso molecular a fim de avaliar possíveis danos ao DNA. Observou-se que as concentrações de 0,5 mg/mL e 1,0 mg/mL de cimitripazepina aumentaram significativamente (p < 0,05) a % de DNA na cauda em relação aos grupos controle e DMSO 1%, caracterizando, assim, efeito genotóxico do alcaloide. No teste de difusão de DNA de baixo peso molecular, não foi observado um aumento significativo da porcentagem de DNA na cauda. Não existe na literatura trabalhos investigando a genotoxicidade dos alcaloides da espécie P. nemorosa; portanto, este trabalho demonstrou pela primeira vez o efeito genotóxico in vitro desse alcaloide na linhagem HepG2. Deve-se levar em consideração aprofundar os estudos dos efeitos genotóxicos e mutagênicos desses compostos bioativos.

The genus Psychotria belongs to the Rubiaceae family and comprises more than 2,000 species, predominantly distributed in tropical and subtropical forests. It is one of the main families of flowering plants of economic interest with pharmacological potential. The Psychotria nemorosa Gardner species (Rubiaceae) is a native shrub that can measure 1 to 2 meters in height with endemic growth in Brazil, found in the Northeast, Midwest, Southeast and South regions. It was recently demonstrated that the alkaloid fraction obtained from its leaves significantly inhibited butyrylcholinesterase (BuChE) and monoamine oxidase A (MAO-A) activities, therefore being an important source of active compounds with effects on the central nervous system (CNS). The main azepine-indole alkaloids in the alkaloid extract of the aerial parts of P. nemorosa are cimitrypazepine, fargesine, nemorosins A and B and nemorosinosides. The aim of this study was to investigate the in vitro genotoxicity of the azepine-indole alkaloid cimitrypazepine, isolated from P. nemorosa in HepG2 human hepatoblastoma cells. The isolated alkaloid was tested at concentrations of 0.1, 0.5 and 1 mg/mL in cell culture medium. Genotoxicity was evaluated by alkaline comet assay and low molecular weight DNA diffusion test in order to assess possible DNA damage. It was observed that the concentrations of 0.5 mg/mL and 1.0 mg/mL of cimitrypazepine significantly increased (p < 0.05) the % of DNA in the tail in relation to the control groups and 1% DMSO, thus characterizing the genotoxic effect of the alkaloid whereas, in the low molecular weight DNA diffusion test, these increase in the % of DNA in the tail was not observed. There are no studies in literature investigating the genotoxicity of alkaloids from the species P. nemorosa, so this work demonstrated for the first time the genotoxic effect of cimitrypazepine in the HepG2 strain. Finally further research of the genotoxic and mutagenic effects of these bioactive compounds must be taken into account.