Efeito dos fármacos PTC-209 e TK-216 em células de sarcoma de Ewing : avaliação da viabilidade e de parâmetros associados a células tronco tumorais

Abstract

O Sarcoma de Ewing (SE) é uma neoplasia pediátrica agressiva caracterizada, principalmente, pela fusão gênica EWSR1-FLI1, responsável pela reprogramação transcricional pró-tumorigênica. Apesar dos avanços no tratamento, pacientes com doença metastática apresentam prognóstico desfavorável, frequentemente associado à manutenção de características de células-tronco tumorais (CTTs). O complexo repressivo Polycomb, especialmente o componente BMI-1, tem sido implicado na autorrenovação de CTTs e na resistência tumoral. Neste contexto, o presente estudo buscou investigar o impacto da inibição de BMI-1 e EWS-FLI1 em células de SE. Utilizando modelos in vitro de cultura celular em monocamada e enriquecida para CSCs, foram avaliadas a viabilidade celular, a capacidade de formação de esferas e a expressão de genes relacionados à malignidade (BMI1, PROM1, SOX2 e ALDH1A1) após o tratamento com os inibidores de BMI-1 (PTC-209) e EWS-FLI1 (TK-216). Os resultados obtidos indicam que a inibição de ambos os alvos compromete a viabilidade celular. Contudo, não foi observada uma ação sinérgica decorrente da combinação dos dois fármacos. Ademais, dados preliminares apontam que o tratamento com TK-216 modula marcadores associados a CTTs e, sozinho ou combinado com tratamento com PTC-209, afeta a morfologia de CTTs de SE.

Ewing sarcoma (ES) is an aggressive pediatric malignancy primarily characterized by the EWSR1-FLI1 gene fusion, which drives pro-tumorigenic transcriptional reprogramming. Despite advances in treatment, patients with metastatic disease have a poor prognosis, often associated with the persistence of cancer stem cell (CSC) characteristics. The Polycomb Repressive Complex, particularly its component BMI-1, has been implicated in CSC self-renewal and tumor resistance. In this context, the present study aimed to investigate the impact of BMI-1 and EWS-FLI1 inhibition in ES cells. Using in vitro monolayer cultures and CSC-enriched models, we assessed cell viability, sphere-forming ability, and the expression of genes related to malignancy (BMI1, PROM1, SOX2, and ALDH1A1) following treatment with BMI-1 (PTC-209) and EWS-FLI1 (TK-216) inhibitors. The results indicate that inhibition of both targets compromises cell viability. However, no synergistic effect was observed from the combination of the two drugs. Additionally, preliminary data suggest that TK-216 treatment modulates CSC-associated markers and, either alone or in combination with PTC-209, affects the morphology of ES CSCs.